河南农业科学 ›› 2010, Vol. 39 ›› Issue (6): 132-135.DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2010.06.039

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弓形虫GRA3基因真核表达质粒的构建与鉴定

薛书江;张守发;栾杨;   

  1. 延边大学农学院;
  • 出版日期:2010-06-15 发布日期:2010-06-15
  • 基金资助:
    延边大学青年科研基金项目(延大科合字(2008)第12号)

  • Published:2010-06-15 Online:2010-06-15

摘要: 以pGEX-GRA3为模板,经PCR扩增获得弓形虫GRA3基因,克隆于pMD-18T simple载体上。重组质粒经PCR鉴定、PstⅠ和XhoⅠ双酶切鉴定后测序分析,再将其定向插入真核表达载体pVAXⅠ,构建真核表达重组质粒pVAX-GRA3。经PCR和酶切鉴定后,将重组质粒pVAX-GRA3转染Hela细胞,然后进行RT-PCR检测。RT-PCR结果表明,检测到了目的基因的存在,说明pVAX-GRA3成功转入Hela细胞。

关键词: 弓形虫, GRA3基因, 真核表达, 鉴定

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